크로마토크래피
Analytical, Measurements, Medical
단일클론항체(mAb), 항체 절편(fragment), 백신과 같은 생체 분자를 정제하는 데 사용되는 솔루션입니다. 화학적으로 서로 연결된 작은 다공성 비드(bead)를 함유하는 겔로, 비드의 구멍은 용출액으로 채워져 있고 다양한 크기를 띕니다. 컬럼 안에 패킹된 크로마토그래피를 위한 고정상(stationary phase)으로, 보통 다공성(porous)의 기본 매트릭스(base matrix)로 구성됩니다. 레진의 기본 매트릭스는 보통 크로마토그래피의 타겟 화합물과 결합할 수 있는 리간드(ligand)와 커플링함으로써 기능화됩니다.
일반적인 단백질은 결합 특이성, 전하, 소수성, 크기와 같은 특성들을 지니며, 이러한 특성들을 여러가지 크로마토그래피 기법에 적용할 수 있습니다.
싸이티바(Cytiva)는 크로마토그래피 기법에 따른 다양한 종류의 레진 제품을 제공합니다.
■ 제품 특징
크기 배제 크로마토그래피 레진이라고도 하며, 겔 여과는 단백질 및 생체 분자의 크기에 따라 분리하는 특성을 지니고 있습니다.
이 방법은 시료의 양이 최소화될 때 사용해야 합니다. 버퍼 조성이 용리에 직접적인 영향을 주지 않으므로 시료의 형태 혹은 다음 정제, 분석, 혹은 보관 단계를 위한 요구 조건을 맞추기 위해 버퍼 조건을 변화시킬 수 있습니다. 분리의 주요 단계가 아래 그림에 나와 있습니다.
가장 높은 용리를 얻기 위해 시료의 양은 총 컬럼 부피의 5%를 넘지 않아야 합니다. 겔 여과는 시료의 농도와 관계가 없습니다.
Gel Filtration Selection Guide 를 참고하세요. 겔 여과에서 효율적인 컬럼 패킹은 필수적입니다. 재현 가능한 결과와 효율적인 수행을 위해 미리 Pre-packed 컬럼을 사용하도록 합니다.
시료 내에 입자상 물질(미세 먼지)이 없어야 합니다. 점성이 있는 시료는 희석해야 합니다. 분리하는 동안 시료 버퍼는 컬럼 내 버퍼으로 교환됩니다.
정제된 산물이 회수될 버퍼을 선택합니다. 버퍼는 단백질 안정성과 활성에 적합해야 합니다. 이온 강도는 매트릭스와의 비특이성 이온 상호작용을 막기 위해 150 mM까지 사용할 수 있습니다. 새로운 시료로 작업할 때 다음과 같은 조건을 먼저 시도해봅니다.
Sephadex™ G-25는 시료 조제와 정화를 위해 탈염, 버퍼 교환, 그리고 지질을 제거하는 데에 사용하고, Mr이 5000을 초과하는 단백질부터는 염을 이용합니다. 또한 겔 여과는 정제 단계 전이나 사이의 시료 조제에 이상적입니다. 총 컬럼 부피의 30%까지 시료를 주입합니다. 단 한 개의 과정으로 시료를 탈염하고 새로운 버퍼으로 교환하며, 분자량이 낮은 물질을 제거합니다.
시료의 양이 많든 적든 빠르고 효율적으로 처리할 수 있습니다. 많은 양의 시료를 주입하면 용리 분리가 낮으나 시료가 최소한으로 희석됩니다.
- 추천 제품 : Superdex™ prep grade, Sepharose™ Fast Flow, Sephacryl™, Sephadex™ G-25
■ 제품 선택 가이드
Cytiva의 SEC 컬럼은 펩타이드부터 매우 큰 단백질, 단백질 복합체, 바이러스까지 분자량 범위 Mr 100 ~ 8,000,000 을 커버합니다.
시료량 및 분획 범위(fractionation range) 고려하여 SEC 컬럼을 선택할 수 있습니다.
| 제목 | 첨부파일 |
|---|---|
| Cytiva 크로마토그래피 컬럼 & 레진 국문 종합카탈로그 | 보기 다운로드 |
| Cytiva 바이오프로세스 크로마토그래피 레진 선택 가이드_국문 | 보기 다운로드 |
| Cytiva Lab scale 크로마토그래피 컬럼,레진 선택 가이드_국문 | 보기 다운로드 |
| Size exclusion chromatography columns and resins (SEC)_선택 가이드 | 보기 다운로드 |
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